眾所周知,細胞復(fù)蘇是細胞低溫保存的關(guān)鍵步驟之一,對細胞活性和功能有重大影響。
近日,原能細胞聯(lián)合美國華盛頓大學(xué)國際醫(yī)學(xué)與生物工程院院士、國際冷凍生物學(xué)協(xié)會主席高大勇教授團隊,以人外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)為研究重點,解讀不同溫度復(fù)蘇對PBMCs活率、回收率、增殖能力和T細胞應(yīng)答能力等的影響。
其研究成果文章:“Effect of Warming Process on the Survival ofCryopreserved Human Peripheral Blood Mononuclear Cells”,發(fā)表在國際生物樣本庫協(xié)會官方雜志《Biopreservation and Biobanking》雜志上。
復(fù)蘇溫度對PBMCs活性的影響
PBMCs(人外周血單個核細胞),是目前免疫治療領(lǐng)域的高熱度細胞,也是基礎(chǔ)研究和臨床研究中非常重要的生物樣本。雖然各大細胞庫和機構(gòu)建立了完善的深低溫存儲體系,但對低溫保存的PBMCs復(fù)蘇的升溫過程缺乏了解和優(yōu)化,而這是全球細胞/免疫療法所亟需解決的問題。
該研究考察了不同溫度復(fù)蘇對PBMCs活性和功能的影響。PBMCs樣本經(jīng)過慢速冷凍后,存儲在液氮罐中,分別在不同溫度(37℃、42℃和65℃)下復(fù)蘇。實驗發(fā)現(xiàn):PBMCs樣本在65℃下進行水浴復(fù)蘇,相比于37℃和42℃復(fù)蘇,可以顯著降低復(fù)蘇所需要的時間,從而減少其在復(fù)溫過程中因重結(jié)晶和潛在的玻璃化造成的低溫損傷,保持了PBMCs各亞群的比例不變,維持了T細胞的活化和增殖能力,縮短了復(fù)蘇時間,提高了細胞的活率和回收率以及T細胞在抗原刺激后細胞因子的分泌能力。
65℃下復(fù)蘇可顯著提高PBMCs的活率和回收率
65℃下復(fù)蘇可顯著提高PBMCs的活率和回收率
不同溫度復(fù)蘇可維持T細胞活化能力不變
65℃下復(fù)蘇可顯著提高在抗原刺激下T細胞分泌細胞因子的能力
靠譜的“CR-200細胞復(fù)蘇儀”
四大優(yōu)勢,細胞復(fù)蘇的好幫手
智能精準控溫,可靠穩(wěn)定
內(nèi)置水溫加熱程序,保障水溫精準可控,為樣本提供可靠、穩(wěn)定的復(fù)蘇環(huán)境。
自動機械作業(yè),均衡可控
自動化純機械振動實現(xiàn)對低溫樣本的穩(wěn)定復(fù)蘇,轉(zhuǎn)速精準可控且均衡。
自動加水,精準設(shè)置不同水位
精準設(shè)置不同水位,水位調(diào)節(jié)范圍:0-70mm(以底部擋板為零位)。具有自動加水功能。當水位低于設(shè)定值時,系統(tǒng)自動加水;反之則自動排水。
預(yù)設(shè)+自定義,一鍵復(fù)蘇,數(shù)據(jù)可追溯
可系統(tǒng)預(yù)設(shè)+自定義各種參數(shù), 一鍵即可下達復(fù)蘇指令,操作便捷高效;且復(fù)蘇參數(shù)與樣本信息有效綁定,數(shù)據(jù)可溯源。
CR-200細胞復(fù)蘇儀,即成為本次研究中的核心角色。據(jù)團隊人員介紹,在進行樣本復(fù)溫實驗中,難度最大的即是復(fù)蘇溫度精度的控制。傳統(tǒng)的手工復(fù)蘇模式,不但費時費力,且精確度難以保證。