小鼠Elisa試劑盒使用說明書與步驟

小鼠Elisa試劑盒說明書：

（1）酶和底物：在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。

（2）抗體：在小鼠Elisa試劑盒應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。

（3）抗原：在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。

（4） 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒包被：將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-生物素間接包被法

（5）固相載體：固相載體是小鼠Elisa試劑盒用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段，應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。

                           

小鼠Elisa試劑盒步驟詳解：

1：留意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運(yùn)用。

2：評價試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品重復(fù)對比實(shí)驗(yàn)，斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。

3：嚴(yán)厲把握顯色時刻，顯色時刻過短，參加小鼠Elisa試劑盒停止液反應(yīng)停止后，底物結(jié)合物的量過少，易呈現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時刻后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色，不行報陽性，這可能是本底顯色的成果。

4：加樣要、快速。如果加樣不，酶生成物的量不能斷定，直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時刻內(nèi)加樣結(jié)束的實(shí)驗(yàn)，如果加樣緩慢，便呈現(xiàn)差錯，并且試劑長時刻暴露在外，特別室溫過高時，保存期會縮短乃至失效。

5：檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)小鼠Elisa試劑盒和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析問題的才干，對實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。

6：運(yùn)用校對過的微量移液器，掃除自然差錯。移液器與否對定量檢測尤為重要。

7：仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)厲依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的當(dāng)?shù)兀�重�?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善。

8：洗刷完全，如若洗板不完全，小鼠Elisa試劑盒結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能呈現(xiàn)假陽性。

9：嚴(yán)控反應(yīng)時刻，反應(yīng)時刻過長，酶失活；反應(yīng)時刻過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實(shí)，容易洗掉，都可能造成假陰性。