大鼠Elisa試劑盒注意事項5點的方法

大鼠Elisa試劑盒操作步驟：

1.  使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
 
2.  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
 
3.  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入大鼠Elisa試劑盒待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
 
4.  甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
 
5.  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
 
6.  甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
 
7.  每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
 
8.  取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
 
9.  在450nm波長處測定各孔的OD值。

大鼠Elisa試劑盒使用注意：
 
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
 
2.若不同批號大鼠Elisa試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。
 
3.反應(yīng)時間的誤差，做大量標(biāo)本時，*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
 
4.臨界值附近標(biāo)本波動為正�，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免�？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
 
5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對加樣器。