大鼠細(xì)胞株操作步驟與注意事項(xiàng)

大鼠細(xì)胞株注意事項(xiàng)：

1、大鼠細(xì)胞株和生物安全柜（或超凈工作臺(tái)）先開(kāi)紫外照射30min。作用：對(duì)環(huán)境滅菌（空氣）。（備注：如果著急，至少也要開(kāi)15分鐘）

在做實(shí)驗(yàn)之前考慮好需要些物品。開(kāi)始照射之前，將所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超凈工作臺(tái)）里面。

常用移液槍或電動(dòng)移液器等，需要在工作臺(tái)上放置一套專(zhuān)用設(shè)備。

細(xì)胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時(shí)更換。

2、 顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意：顯微鏡一般都放在細(xì)胞房。

3、 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)之前，首先給自己帶上拖鞋、頭套，口罩，實(shí)驗(yàn)服，手套（手套帶雙層）。注意：手套要將袖口套進(jìn)去。實(shí)驗(yàn)服、拖鞋*是細(xì)胞房專(zhuān)用。

4、 開(kāi)始操作之前先觀察大鼠心肌細(xì)胞株細(xì)胞。

首先觀察細(xì)胞培養(yǎng)液的顏色�，F(xiàn)在的細(xì)胞培養(yǎng)液通常都放有酸堿指示劑（絕大部分是酚紅）。細(xì)胞在培養(yǎng)生長(zhǎng)過(guò)程中，不斷在培養(yǎng)液上清中累積酸性物質(zhì)，時(shí)間長(zhǎng)了，培養(yǎng)液變?yōu)辄S色（同時(shí)培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡）。

其次鏡下觀察大鼠心肌細(xì)胞株細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是否良好，是否需要傳代。如果生長(zhǎng)狀態(tài)不好，需要對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行調(diào)整（一般是加大血清濃度）。過(guò)于密集出現(xiàn)大片融合或太密集而導(dǎo)致細(xì)胞脫落，則進(jìn)行傳代。

如果長(zhǎng)勢(shì)良好，且細(xì)胞培養(yǎng)液顏色未發(fā)生變化，可以酌情進(jìn)行1/2、 1/3、1/4換液，也可以全換液。總之，視細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定。

大鼠細(xì)胞株操作步驟：

1.吸取樣品時(shí)，加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體；加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體，這樣會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，加樣不準(zhǔn)確。

2.不要將吸頭伸入孔中，一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭，另一方面可能會(huì)將孔中的液體吹起來(lái)，加樣不準(zhǔn)確。

其實(shí)給大鼠細(xì)胞株樣本加樣并不是什么大問(wèn)題，很多事情往往是被操作者們給想復(fù)雜了，只要有足夠的耐心與認(rèn)真，就一定可以做出漂亮的實(shí)驗(yàn)！