蛋白elisa試劑盒的操作方法
瀏覽次數(shù):247 發(fā)布日期:2021-3-23
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蛋白elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
蛋白elisa試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞 培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。 仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分 鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保 存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分 )。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀 釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃 取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS, PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入 一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿 化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢 測(cè),其余冷凍備用。
保存及運(yùn)輸溫度:2-8℃低溫避光保存公司批次ELISA試劑盒供應(yīng),常見ELISA試劑盒五折銷售。
蛋白elisa試劑盒的操作方法:
(1)將抗原按一定的梯度倍比稀釋后,按照ELISA從上到下(或者從左到右)的順序包被。
(2)將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA從左到右或者從上到下加入。(3)二抗的稀釋倍數(shù)是一定的,然后顯色,讀值。