MRM定制靶標(biāo)檢測的操作技術(shù)介紹及案例分析

定制靶標(biāo)檢測是以標(biāo)準(zhǔn)品為參考，針對特定某一物質(zhì)或一類代謝物進(jìn)行檢測的代謝組學(xué)方法，選擇特異性的樣本前處理方法，優(yōu)化色譜分離及質(zhì)譜條件等對這些代謝物進(jìn)行最優(yōu)化檢測，大大提高了檢測的靈敏度、準(zhǔn)確性、特異性及重現(xiàn)性，從而對目標(biāo)代謝物進(jìn)行絕對定量研究。

 

技術(shù)優(yōu)勢

定性準(zhǔn)確：基于標(biāo)準(zhǔn)品開發(fā)物質(zhì)，樣本物質(zhì)二級譜和標(biāo)品二級譜逐一核對；

定量精確：選擇最優(yōu)離子對，確保物質(zhì)精確定量；

靈敏度高：基于先進(jìn)的質(zhì)譜平臺，靈敏度可達(dá)pg級；

研發(fā)團隊經(jīng)驗豐富：脂質(zhì)、維生素、氨基酸、生物堿、有機酸等物質(zhì)開發(fā)經(jīng)驗。

 

技術(shù)路線
 

 

樣本要求

植物組織：200-500mg/sample

動物及臨床組織標(biāo)本：200mg/sample

血清、血漿：200μL/sample

微生物、細(xì)胞：1X107cells/sample

尿液：1mL/sample

 

生物學(xué)重復(fù)

臨床標(biāo)本不低于30個生物學(xué)重復(fù)

動物樣本不低于10個生物學(xué)重復(fù)

植物、微生物樣本不低于6個生物學(xué)重復(fù)

 

檢測平臺

ABSciexQTRAP® 6500+

 

常規(guī)項目周期

實驗檢測:45個自然日

數(shù)據(jù)分析:5個自然日

 

應(yīng)用方向

1、目標(biāo)代謝物的準(zhǔn)確定量；

2、組學(xué)數(shù)據(jù)和實驗結(jié)果的驗證；

3、針對特定代謝物研究代謝模型。

 

案例分析

急性缺血性中風(fēng)(AIS)代謝生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)

中風(fēng)仍然是全球主要的公共健康問題，它會導(dǎo)致嚴(yán)重的殘疾和較高的死亡率。然而中風(fēng)的早期診斷是困難的，目前還沒有建立可靠的生物標(biāo)志物。最近，代謝組學(xué)研究為生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)提供了新的思路。本研究首先通過非靶標(biāo)代謝組對40例AIS患者和40例健康血清樣進(jìn)行檢測，篩選出26個差異代謝物質(zhì)，然后用靶標(biāo)代謝組學(xué)對潛在標(biāo)志物進(jìn)行驗證，篩選出5種可以作為AIS的潛在biomaker，為AIS未來的診斷和治療發(fā)展提供了研究基礎(chǔ)。

 

圖3 AIS潛在生物標(biāo)志物的生物學(xué)意義示意圖