多克隆抗體特點及優(yōu)缺點
瀏覽次數(shù):928 發(fā)布日期:2021-9-22
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抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,最終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。在同一種抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體 (polyclonal antibody)。
特點:識別任一抗原上的多個表位。所得血清為異質(zhì)性抗體混合物,其親和力各有不同。
多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。
通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標(biāo)的多克隆抗體,尤其是針對高同源性的蛋白家族。
抗體制備:制備成本低廉且制備速度較快。
制備過程比單克隆抗體簡單。
優(yōu)點:多克隆抗體可識別任一抗原上的多個表位,因此具有以下優(yōu)點:
高親和性:由于靶蛋白上的多個表位能夠結(jié)合不止一個抗體分子,多克隆抗體可放大低表達(dá)水平靶蛋白的信號。但是,這會影響定量實驗(如流式細(xì)胞術(shù)實驗)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
可識別多個表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實驗獲得更好的結(jié)果。
與單克隆抗體相比,對微小抗原變化(例如多態(tài)性、糖基化異質(zhì)性或者輕微變性)的包容性更強。
可識別與免疫原蛋白質(zhì)具有高度同源性的蛋白質(zhì),還可用于篩查非免疫原物種的靶蛋白。
通常是檢測變性蛋白質(zhì)的首選。
多表位通?商嵘龣z測的穩(wěn)定性。
缺點:易產(chǎn)生批次間差異。
產(chǎn)生大量非特異性抗體,可能會在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號。
由于具有多個表位,檢測免疫原序列的交叉反應(yīng)性非常重要。
不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因為抗血清通常會識別多個結(jié)構(gòu)域。