其它試劑類注意事項與操作技巧

其它試劑類​注意事項：

１．其它試劑類反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

其它試劑類操作技巧：

1.操作前應對試驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度（保持在18 C～25℃）、反應孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，其它試劑類是否符合要求。

2.正確使用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次第要與說明書一起，否則可導致效果過錯，試驗重復性差。

3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大，洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù)，洗液在反應孑L內停留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流，形成孔問污染，導致假陰性或假陽性。

4.要保證加液量一起 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，形成顯色不一致，判別過錯。

 5.顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應，顯色液量不能過多，避免顯色過強。為了減小過失，是先稀釋再加樣。