多克隆抗體特點(diǎn)及優(yōu)缺點(diǎn)
瀏覽次數(shù):929 發(fā)布日期:2021-9-22
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抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,最終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。在同一種抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體 (polyclonal antibody)。
特點(diǎn):識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位。所得血清為異質(zhì)性抗體混合物,其親和力各有不同。
多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。
通常使用多肽免疫原制備以獨(dú)有表位為靶標(biāo)的多克隆抗體,尤其是針對(duì)高同源性的蛋白家族。
抗體制備:制備成本低廉且制備速度較快。
制備過程比單克隆抗體簡(jiǎn)單。
優(yōu)點(diǎn):多克隆抗體可識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位,因此具有以下優(yōu)點(diǎn):
高親和性:由于靶蛋白上的多個(gè)表位能夠結(jié)合不止一個(gè)抗體分子,多克隆抗體可放大低表達(dá)水平靶蛋白的信號(hào)。但是,這會(huì)影響定量實(shí)驗(yàn)(如流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn))結(jié)果的準(zhǔn)確性。
可識(shí)別多個(gè)表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實(shí)驗(yàn)獲得更好的結(jié)果。
與單克隆抗體相比,對(duì)微小抗原變化(例如多態(tài)性、糖基化異質(zhì)性或者輕微變性)的包容性更強(qiáng)。
可識(shí)別與免疫原蛋白質(zhì)具有高度同源性的蛋白質(zhì),還可用于篩查非免疫原物種的靶蛋白。
通常是檢測(cè)變性蛋白質(zhì)的首選。
多表位通常可提升檢測(cè)的穩(wěn)定性。
缺點(diǎn):易產(chǎn)生批次間差異。
產(chǎn)生大量非特異性抗體,可能會(huì)在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號(hào)。
由于具有多個(gè)表位,檢測(cè)免疫原序列的交叉反應(yīng)性非常重要。
不適用于探測(cè)抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因?yàn)榭寡逋ǔ?huì)識(shí)別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。