Thp-1人單核細(xì)胞白血病的培養(yǎng)復(fù)蘇和常見問題解答
【細(xì)胞介紹】
THP-1是一種人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系，最初從一位1歲患有急性單核細(xì)胞白血病的男孩的外周血中分離出來的單核細(xì)胞。該細(xì)胞對(duì)乳汁珠和激活的紅細(xì)胞有吞噬作用，無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。 可以用佛波醇 TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化。表達(dá)C3R和FcR；可作為轉(zhuǎn)染宿主。也因其能夠被誘導(dǎo)分化成單核/巨噬細(xì)胞，所以在免疫學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。例如：巨噬細(xì)胞分化與炎癥模型、基因編輯研究、免疫調(diào)節(jié)作用研究、疾病模型構(gòu)建與藥物篩選、STING激動(dòng)劑篩選模型、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期研究、表觀遺傳調(diào)控研究等。這些應(yīng)用展示了THP-1細(xì)胞系在免疫學(xué)研究中的多樣性和重要性，為理解免疫調(diào)節(jié)和疾病機(jī)制提供了寶貴的工具。
細(xì)胞生長狀態(tài)：THP-1細(xì)胞是懸浮生長并形成松散的團(tuán)塊，幾乎沒有細(xì)胞附著，細(xì)胞倍增時(shí)間為60-70h。
形態(tài)：在Wright-giemsa染色涂片中，即有圓形細(xì)胞也有一些多邊形細(xì)胞，直徑為12-14μM，細(xì)胞中有少量嗜堿性的胞漿，胞漿中含有少量嗜藍(lán)顆粒和少量液泡，細(xì)胞核呈鋸齒狀，形狀不規(guī)則。
細(xì)胞名稱：Thp-1人單核細(xì)胞白血病
細(xì)胞別稱：THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1
產(chǎn)品貨號(hào)：ZQ0086
生長特性：懸浮、低密度容易聚團(tuán)，高密度分散
培養(yǎng)條件 ：RPMI-1640（中喬新舟貨號(hào)：ZQ-200）+10%胎牛血清（中喬新舟貨號(hào)：ZQ0500）+1%雙抗（中喬新舟貨號(hào)：CSP006）+β-Mer 終濃度：0.05mM（中喬新舟貨號(hào)：CSP005，例：500ml添加500ul）
完全培養(yǎng)基貨號(hào)：ZM0086
【細(xì)胞傳代】
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞。根據(jù)我司培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)
A:當(dāng)培養(yǎng)基顏色比較黃時(shí)，建議離心換液,細(xì)胞沉淀用手指彈松后添加完全培養(yǎng)基均勻移入兩個(gè)新的 T25培養(yǎng)瓶中維續(xù)培養(yǎng)即可(1:2 傳代)。
B:細(xì)胞數(shù)量多，液體不黃，建議使用【半換液法】添加一半新培養(yǎng)基并進(jìn)行分瓶(1:2傳）。
THP-1細(xì)胞為懸浮細(xì)胞且具有低密度依賴性，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到8×105個(gè)活細(xì)胞/ mL時(shí)需要進(jìn)行傳代。細(xì)胞密度不要超過1×106活細(xì)胞/ mL。比例一般為1:2-4，可以分瓶后補(bǔ)充培養(yǎng)液，不需要離心，t25培養(yǎng)瓶分瓶后補(bǔ)充新鮮完全培養(yǎng)基到7ml，如果對(duì)懸浮細(xì)胞密度把控不好可以，最佳的方式是進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。培養(yǎng)一周左右可以離心一次，以去除一些死細(xì)胞。
該細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，可能會(huì)有少量貼壁或聚集成小團(tuán)生長，屬于正常情況。傳代時(shí)可以輕輕打散，如少許細(xì)胞已貼壁則傳代時(shí)丟棄，小團(tuán)生長的細(xì)胞正常傳代培養(yǎng)即可。
該細(xì)胞對(duì)細(xì)胞密度較為敏感，培養(yǎng)、傳代時(shí)請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍。
該細(xì)胞較難復(fù)蘇，復(fù)蘇后需要約7天左右才可能恢復(fù)至正常狀態(tài)。剛復(fù)蘇后，細(xì)胞生長緩慢且會(huì)出現(xiàn)黑色細(xì)胞碎片，少量細(xì)胞碎片不影響細(xì)胞正常生長，待細(xì)胞恢復(fù)生長后用半換液法可以稀釋碎片。
細(xì)胞凍存時(shí)務(wù)請(qǐng)?zhí)岣呒?xì)胞密度，建議1個(gè)T25培養(yǎng)瓶中含有3-5×106細(xì)胞量時(shí)凍存一支。
該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感，我司建議您使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)或選擇訂購我司配套THP-1完全培養(yǎng)液。
【細(xì)胞凍存】
1、細(xì)胞密度80%以上，活細(xì)胞百分率達(dá)95%以上時(shí)，將細(xì)胞按照以上步驟進(jìn)行消化收集細(xì)胞沉淀進(jìn)行凍存。
2、細(xì)胞沉淀用適量通用含血清型程序凍存液（貨號(hào)：CSP169）重懸， 建議一瓶T25細(xì)胞凍存一管（1ml/管），然后將分裝好的細(xì)胞凍存管進(jìn)行程序性降溫凍存，凍存細(xì)胞降溫程序（2-8℃，放置40min;-20℃,放置30min-60min,-80℃放置一天后轉(zhuǎn)移至液氮保存）或使用程序降溫盒降溫后，再轉(zhuǎn)至液氨罐中長期保存。
【細(xì)胞復(fù)蘇】
THP-1細(xì)胞復(fù)蘇后通常需要3-5天恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞對(duì)密度有一定依賴性，如果復(fù)蘇時(shí)離心去除了凍存液，建議復(fù)蘇后48小時(shí)內(nèi)不要進(jìn)行操作。密度低時(shí)細(xì)胞會(huì)抱團(tuán)生長屬于細(xì)胞快速增殖生長的一個(gè)階段，是正常情況。
凍管細(xì)胞復(fù)蘇：
1、液氮取出的細(xì)胞放入干冰中轉(zhuǎn)移至細(xì)胞房，提前準(zhǔn)備好完全培養(yǎng)基，離心管等試劑和耗材。
2、凍管細(xì)胞在37°C水浴中迅速解凍（大約1-2分鐘）。為了減少污染的可能性，保持凍管瓶蓋在水浴液面之上。 一旦大部分內(nèi)容物解凍，立即將凍管移出水浴，70%的乙醇消毒凍管外壁。
3、將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到含3-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中，輕輕混勻，離心（125 g，3～5分鐘）1000-1200rmp去除培養(yǎng)基， 管底細(xì)胞沉淀用手指彈松，再添加3ml完全培養(yǎng)基至離心管內(nèi)混勻細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)。
4、用適量完全培養(yǎng)基將細(xì)胞密度調(diào)整至0.6-2.0X105，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再將瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。T25培養(yǎng)瓶建議添加5-7ml完全培養(yǎng)基。當(dāng)密度達(dá)到80%以上時(shí)傳代。
【常見問題】
1. THP-1細(xì)胞培養(yǎng)過程中貼壁問題？
1）THP-1細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)少量細(xì)胞貼壁屬于正常情況，THP-1細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)自發(fā)貼壁，可以輕吹收集細(xì)胞或者丟棄貼壁部分細(xì)胞；
2）當(dāng)貼壁細(xì)胞比例高于20%，建議排查細(xì)胞生長培養(yǎng)箱溫度及CO2濃度、培養(yǎng)基成分（營養(yǎng)體系的酸堿性）、以及培養(yǎng)瓶可用非TC處理過的培養(yǎng)瓶，不利于細(xì)胞貼壁；
3）更換血清可能會(huì)導(dǎo)致THP-1細(xì)胞很容易分化成為巨噬細(xì)胞。
2. THP-1細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的聚團(tuán)問題？
1）THP-1細(xì)胞在密度較稀時(shí)，有少量細(xì)胞聚團(tuán)屬于正常現(xiàn)象，不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞吹散，等細(xì)胞密度增高時(shí)，細(xì)胞會(huì)自然分散開；
2）細(xì)胞密度高時(shí)，聚團(tuán)細(xì)胞比例高于30%時(shí)，并且細(xì)胞團(tuán)呈糜爛狀，細(xì)胞之間界限不清，胞體質(zhì)膜有潰爛感，這種情況下的細(xì)胞聚團(tuán)是異常的，建議排查營養(yǎng)體系的酸堿性、培養(yǎng)箱環(huán)境問題、更換血清品牌或增大血清比例（不超過20%）有助于解決聚團(tuán)問題。
3.THP-1復(fù)蘇不起來怎么辦？
1）THP-1細(xì)胞對(duì)凍存條件比較敏感，復(fù)蘇存活率受凍存體系、凍存和復(fù)蘇流程影響比較大。該細(xì)胞凍存后復(fù)蘇率較低，凍存時(shí)請(qǐng)酌情提高細(xì)胞量，凍存時(shí)活細(xì)胞密度不能低于100萬-300萬/mL，同時(shí)復(fù)蘇密度也有依賴性，細(xì)胞復(fù)蘇后需要培養(yǎng)3-5天狀態(tài)才能恢復(fù)，如有細(xì)胞碎片，待細(xì)胞密度增大后通過低速離心去除。
2）該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，在培養(yǎng)時(shí)更喜歡溫和處理，細(xì)胞密度低時(shí)，培養(yǎng)時(shí)盡量少對(duì)細(xì)胞進(jìn)行離心處理以此造成對(duì)細(xì)胞的傷害。換液時(shí)不要全培養(yǎng)基更換。
3 ）THP-1細(xì)胞中需要添加β-巰基乙醇，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可直接添加至完培中長期儲(chǔ)存，會(huì)影響β-巰基乙醇的穩(wěn)定性。
4. 培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇（ β-mercaptoethanol）嗎？
β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補(bǔ)充劑，有抗氧化的作用，可減少氧化應(yīng)激對(duì)THP-1細(xì)胞的影響；當(dāng)細(xì)胞密度過大但需要維持細(xì)胞狀態(tài)時(shí)，可適當(dāng)增加β-巰基乙醇的比例（不超過標(biāo)準(zhǔn)量的1.5倍）。
【注意事項(xiàng)】
1.該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞。根據(jù)我司培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)A:當(dāng)培養(yǎng)基顏色比較黃時(shí)，建議離心換液,細(xì)胞沉淀用手指彈松后添加完全培養(yǎng)基均勻移入兩個(gè)新的 T25培養(yǎng)瓶中維續(xù)培養(yǎng)即可(1:2 傳代)。B:細(xì)胞數(shù)量多，液體不黃，建議使用【半換液法】添加一半新培養(yǎng)基并進(jìn)行分瓶(1:2傳）。
2. 該細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，可能會(huì)有少量貼壁或聚集成小團(tuán)生長，屬于正常情況。傳代時(shí)可以輕輕打散，如少許細(xì)胞已貼壁則傳代時(shí)丟棄，小團(tuán)生長的細(xì)胞正常傳代培養(yǎng)即可。
3. 該細(xì)胞對(duì)細(xì)胞密度較為敏感，培養(yǎng)、傳代時(shí)請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍。
4. 該細(xì)胞較難復(fù)蘇，復(fù)蘇后需要約7天左右才可能恢復(fù)至正常狀態(tài)。剛復(fù)蘇后，細(xì)胞生長緩慢且會(huì)出現(xiàn)黑色細(xì)胞碎片，少量細(xì)胞碎片不影響細(xì)胞正常生長，待細(xì)胞恢復(fù)生長后用半換液法可以稀釋碎片。
5. 細(xì)胞凍存時(shí)務(wù)請(qǐng)?zhí)岣呒?xì)胞密度，建議1個(gè)T25培養(yǎng)瓶中含有3-5×106細(xì)胞量時(shí)凍存一支。
6. 該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感，我司建議您使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)或選擇訂購我司配套THP-1完全培養(yǎng)液。
【發(fā)表過的文獻(xiàn)】
截至到2024年，引用中喬新舟該細(xì)胞發(fā)表過的文獻(xiàn)總數(shù)42篇，總的影響因子228.79，最高影響因子33.50.
下面列舉了幾篇代表性的文獻(xiàn)，可以參考：
1.論文題目：Multi-dimensional single-cell characterization revealed suppressive immune microenvironment in AFP-positive hepatocellular carcinoma
期刊： Cell Discovery 影響因子：33.5
2.論文題目：Exosomal ncRNAs profiling of mycobacterial infection identified miRNA-185-5p as a novel biomarker for tuberculosis
期刊：BRIEFINGS IN BIOINFORMATICS 影響因子：11.622
3.論文題目：45S5 Bioglass® works synergistically with siRNA to downregulate the expression of matrix metalloproteinase-9 in diabetic wounds
期刊：Acta Biomaterialia 影響因子：10.633
4.論文題目：Genetically engineered CXCR4-modified exosomes for delivery of miR-126 mimics to macrophages alleviate periodontitis
期刊：JOURNAL OF NANOBIOTECHNOLOGY 影響因子：10.2
5.論文題目：Myeloid cell-expressed MNDA enhances M2 polarization to facilitate the metastasis of hepatocellular carcinoma
期刊：International Journal of Biological Sciences 影響因子：8.2
THP-1是一種人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系，最初從一位1歲患有急性單核細(xì)胞白血病的男孩的外周血中分離出來的單核細(xì)胞。該細(xì)胞對(duì)乳汁珠和激活的紅細(xì)胞有吞噬作用，無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。 可以用佛波醇 TPA誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化。表達(dá)C3R和FcR；可作為轉(zhuǎn)染宿主。也因其能夠被誘導(dǎo)分化成單核/巨噬細(xì)胞，所以在免疫學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。例如：巨噬細(xì)胞分化與炎癥模型、基因編輯研究、免疫調(diào)節(jié)作用研究、疾病模型構(gòu)建與藥物篩選、STING激動(dòng)劑篩選模型、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期研究、表觀遺傳調(diào)控研究等。這些應(yīng)用展示了THP-1細(xì)胞系在免疫學(xué)研究中的多樣性和重要性，為理解免疫調(diào)節(jié)和疾病機(jī)制提供了寶貴的工具。
細(xì)胞生長狀態(tài)：THP-1細(xì)胞是懸浮生長并形成松散的團(tuán)塊，幾乎沒有細(xì)胞附著，細(xì)胞倍增時(shí)間為60-70h。
形態(tài)：在Wright-giemsa染色涂片中，即有圓形細(xì)胞也有一些多邊形細(xì)胞，直徑為12-14μM，細(xì)胞中有少量嗜堿性的胞漿，胞漿中含有少量嗜藍(lán)顆粒和少量液泡，細(xì)胞核呈鋸齒狀，形狀不規(guī)則。
細(xì)胞名稱：Thp-1人單核細(xì)胞白血病
細(xì)胞別稱：THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1
產(chǎn)品貨號(hào)：ZQ0086
生長特性：懸浮、低密度容易聚團(tuán)，高密度分散
培養(yǎng)條件 ：RPMI-1640（中喬新舟貨號(hào)：ZQ-200）+10%胎牛血清（中喬新舟貨號(hào)：ZQ0500）+1%雙抗（中喬新舟貨號(hào)：CSP006）+β-Mer 終濃度：0.05mM（中喬新舟貨號(hào)：CSP005，例：500ml添加500ul）
完全培養(yǎng)基貨號(hào)：ZM0086
【細(xì)胞傳代】
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞。根據(jù)我司培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)
A:當(dāng)培養(yǎng)基顏色比較黃時(shí)，建議離心換液,細(xì)胞沉淀用手指彈松后添加完全培養(yǎng)基均勻移入兩個(gè)新的 T25培養(yǎng)瓶中維續(xù)培養(yǎng)即可(1:2 傳代)。
B:細(xì)胞數(shù)量多，液體不黃，建議使用【半換液法】添加一半新培養(yǎng)基并進(jìn)行分瓶(1:2傳）。
THP-1細(xì)胞為懸浮細(xì)胞且具有低密度依賴性，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到8×105個(gè)活細(xì)胞/ mL時(shí)需要進(jìn)行傳代。細(xì)胞密度不要超過1×106活細(xì)胞/ mL。比例一般為1:2-4，可以分瓶后補(bǔ)充培養(yǎng)液，不需要離心，t25培養(yǎng)瓶分瓶后補(bǔ)充新鮮完全培養(yǎng)基到7ml，如果對(duì)懸浮細(xì)胞密度把控不好可以，最佳的方式是進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。培養(yǎng)一周左右可以離心一次，以去除一些死細(xì)胞。
該細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，可能會(huì)有少量貼壁或聚集成小團(tuán)生長，屬于正常情況。傳代時(shí)可以輕輕打散，如少許細(xì)胞已貼壁則傳代時(shí)丟棄，小團(tuán)生長的細(xì)胞正常傳代培養(yǎng)即可。
該細(xì)胞對(duì)細(xì)胞密度較為敏感，培養(yǎng)、傳代時(shí)請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍。
該細(xì)胞較難復(fù)蘇，復(fù)蘇后需要約7天左右才可能恢復(fù)至正常狀態(tài)。剛復(fù)蘇后，細(xì)胞生長緩慢且會(huì)出現(xiàn)黑色細(xì)胞碎片，少量細(xì)胞碎片不影響細(xì)胞正常生長，待細(xì)胞恢復(fù)生長后用半換液法可以稀釋碎片。
細(xì)胞凍存時(shí)務(wù)請(qǐng)?zhí)岣呒?xì)胞密度，建議1個(gè)T25培養(yǎng)瓶中含有3-5×106細(xì)胞量時(shí)凍存一支。
該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感，我司建議您使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)或選擇訂購我司配套THP-1完全培養(yǎng)液。
【細(xì)胞凍存】
1、細(xì)胞密度80%以上，活細(xì)胞百分率達(dá)95%以上時(shí)，將細(xì)胞按照以上步驟進(jìn)行消化收集細(xì)胞沉淀進(jìn)行凍存。
2、細(xì)胞沉淀用適量通用含血清型程序凍存液（貨號(hào)：CSP169）重懸， 建議一瓶T25細(xì)胞凍存一管（1ml/管），然后將分裝好的細(xì)胞凍存管進(jìn)行程序性降溫凍存，凍存細(xì)胞降溫程序（2-8℃，放置40min;-20℃,放置30min-60min,-80℃放置一天后轉(zhuǎn)移至液氮保存）或使用程序降溫盒降溫后，再轉(zhuǎn)至液氨罐中長期保存。
【細(xì)胞復(fù)蘇】
THP-1細(xì)胞復(fù)蘇后通常需要3-5天恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞對(duì)密度有一定依賴性，如果復(fù)蘇時(shí)離心去除了凍存液，建議復(fù)蘇后48小時(shí)內(nèi)不要進(jìn)行操作。密度低時(shí)細(xì)胞會(huì)抱團(tuán)生長屬于細(xì)胞快速增殖生長的一個(gè)階段，是正常情況。
凍管細(xì)胞復(fù)蘇：
1、液氮取出的細(xì)胞放入干冰中轉(zhuǎn)移至細(xì)胞房，提前準(zhǔn)備好完全培養(yǎng)基，離心管等試劑和耗材。
2、凍管細(xì)胞在37°C水浴中迅速解凍（大約1-2分鐘）。為了減少污染的可能性，保持凍管瓶蓋在水浴液面之上。 一旦大部分內(nèi)容物解凍，立即將凍管移出水浴，70%的乙醇消毒凍管外壁。
3、將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到含3-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中，輕輕混勻，離心（125 g，3～5分鐘）1000-1200rmp去除培養(yǎng)基， 管底細(xì)胞沉淀用手指彈松，再添加3ml完全培養(yǎng)基至離心管內(nèi)混勻細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)。
4、用適量完全培養(yǎng)基將細(xì)胞密度調(diào)整至0.6-2.0X105，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再將瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。T25培養(yǎng)瓶建議添加5-7ml完全培養(yǎng)基。當(dāng)密度達(dá)到80%以上時(shí)傳代。
【常見問題】
1. THP-1細(xì)胞培養(yǎng)過程中貼壁問題？
1）THP-1細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)少量細(xì)胞貼壁屬于正常情況，THP-1細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)自發(fā)貼壁，可以輕吹收集細(xì)胞或者丟棄貼壁部分細(xì)胞；
2）當(dāng)貼壁細(xì)胞比例高于20%，建議排查細(xì)胞生長培養(yǎng)箱溫度及CO2濃度、培養(yǎng)基成分（營養(yǎng)體系的酸堿性）、以及培養(yǎng)瓶可用非TC處理過的培養(yǎng)瓶，不利于細(xì)胞貼壁；
3）更換血清可能會(huì)導(dǎo)致THP-1細(xì)胞很容易分化成為巨噬細(xì)胞。
2. THP-1細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的聚團(tuán)問題？
1）THP-1細(xì)胞在密度較稀時(shí)，有少量細(xì)胞聚團(tuán)屬于正常現(xiàn)象，不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞吹散，等細(xì)胞密度增高時(shí)，細(xì)胞會(huì)自然分散開；
2）細(xì)胞密度高時(shí)，聚團(tuán)細(xì)胞比例高于30%時(shí)，并且細(xì)胞團(tuán)呈糜爛狀，細(xì)胞之間界限不清，胞體質(zhì)膜有潰爛感，這種情況下的細(xì)胞聚團(tuán)是異常的，建議排查營養(yǎng)體系的酸堿性、培養(yǎng)箱環(huán)境問題、更換血清品牌或增大血清比例（不超過20%）有助于解決聚團(tuán)問題。
3.THP-1復(fù)蘇不起來怎么辦？
1）THP-1細(xì)胞對(duì)凍存條件比較敏感，復(fù)蘇存活率受凍存體系、凍存和復(fù)蘇流程影響比較大。該細(xì)胞凍存后復(fù)蘇率較低，凍存時(shí)請(qǐng)酌情提高細(xì)胞量，凍存時(shí)活細(xì)胞密度不能低于100萬-300萬/mL，同時(shí)復(fù)蘇密度也有依賴性，細(xì)胞復(fù)蘇后需要培養(yǎng)3-5天狀態(tài)才能恢復(fù)，如有細(xì)胞碎片，待細(xì)胞密度增大后通過低速離心去除。
2）該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，在培養(yǎng)時(shí)更喜歡溫和處理，細(xì)胞密度低時(shí)，培養(yǎng)時(shí)盡量少對(duì)細(xì)胞進(jìn)行離心處理以此造成對(duì)細(xì)胞的傷害。換液時(shí)不要全培養(yǎng)基更換。
3 ）THP-1細(xì)胞中需要添加β-巰基乙醇，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可直接添加至完培中長期儲(chǔ)存，會(huì)影響β-巰基乙醇的穩(wěn)定性。
4. 培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇（ β-mercaptoethanol）嗎？
β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補(bǔ)充劑，有抗氧化的作用，可減少氧化應(yīng)激對(duì)THP-1細(xì)胞的影響；當(dāng)細(xì)胞密度過大但需要維持細(xì)胞狀態(tài)時(shí)，可適當(dāng)增加β-巰基乙醇的比例（不超過標(biāo)準(zhǔn)量的1.5倍）。
【注意事項(xiàng)】
1.該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞。根據(jù)我司培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)A:當(dāng)培養(yǎng)基顏色比較黃時(shí)，建議離心換液,細(xì)胞沉淀用手指彈松后添加完全培養(yǎng)基均勻移入兩個(gè)新的 T25培養(yǎng)瓶中維續(xù)培養(yǎng)即可(1:2 傳代)。B:細(xì)胞數(shù)量多，液體不黃，建議使用【半換液法】添加一半新培養(yǎng)基并進(jìn)行分瓶(1:2傳）。
2. 該細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，可能會(huì)有少量貼壁或聚集成小團(tuán)生長，屬于正常情況。傳代時(shí)可以輕輕打散，如少許細(xì)胞已貼壁則傳代時(shí)丟棄，小團(tuán)生長的細(xì)胞正常傳代培養(yǎng)即可。
3. 該細(xì)胞對(duì)細(xì)胞密度較為敏感，培養(yǎng)、傳代時(shí)請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍。
4. 該細(xì)胞較難復(fù)蘇，復(fù)蘇后需要約7天左右才可能恢復(fù)至正常狀態(tài)。剛復(fù)蘇后，細(xì)胞生長緩慢且會(huì)出現(xiàn)黑色細(xì)胞碎片，少量細(xì)胞碎片不影響細(xì)胞正常生長，待細(xì)胞恢復(fù)生長后用半換液法可以稀釋碎片。
5. 細(xì)胞凍存時(shí)務(wù)請(qǐng)?zhí)岣呒?xì)胞密度，建議1個(gè)T25培養(yǎng)瓶中含有3-5×106細(xì)胞量時(shí)凍存一支。
6. 該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感，我司建議您使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)或選擇訂購我司配套THP-1完全培養(yǎng)液。
【發(fā)表過的文獻(xiàn)】
截至到2024年，引用中喬新舟該細(xì)胞發(fā)表過的文獻(xiàn)總數(shù)42篇，總的影響因子228.79，最高影響因子33.50.
下面列舉了幾篇代表性的文獻(xiàn)，可以參考：
1.論文題目：Multi-dimensional single-cell characterization revealed suppressive immune microenvironment in AFP-positive hepatocellular carcinoma
期刊： Cell Discovery 影響因子：33.5
2.論文題目：Exosomal ncRNAs profiling of mycobacterial infection identified miRNA-185-5p as a novel biomarker for tuberculosis
期刊：BRIEFINGS IN BIOINFORMATICS 影響因子：11.622
3.論文題目：45S5 Bioglass® works synergistically with siRNA to downregulate the expression of matrix metalloproteinase-9 in diabetic wounds
期刊：Acta Biomaterialia 影響因子：10.633
4.論文題目：Genetically engineered CXCR4-modified exosomes for delivery of miR-126 mimics to macrophages alleviate periodontitis
期刊：JOURNAL OF NANOBIOTECHNOLOGY 影響因子：10.2
5.論文題目：Myeloid cell-expressed MNDA enhances M2 polarization to facilitate the metastasis of hepatocellular carcinoma
期刊：International Journal of Biological Sciences 影響因子：8.2
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