病毒沉淀劑產(chǎn)品特點(diǎn)與使用方法

生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、能濃縮病毒100倍以上，適合各種病毒。
2、比超速離心法、密度梯度離心分離法和過濾法更溫和，回收率更高，并且大部分病毒能保持活性，適合各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)，包括轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和核酸純化。
3、比超速離心法和密度梯度離心分離法簡單，不需要大型離心機(jī)等設(shè)備。
4、適合水樣、細(xì)胞培養(yǎng)基上清和其他不含細(xì)胞的樣品。本產(chǎn)品100mL可以處理400mL含病毒的溶液，可以將病毒濃縮100倍以上。
5、已經(jīng)成功用于coronaviruses、rhabdoviruses、parainfluenzaviruses、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses等病毒。
6、對(duì)環(huán)境水樣，請(qǐng)不要使用本產(chǎn)品，而是使用水體病毒沉淀劑。
儲(chǔ)存條件：
常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。
自備試劑：
PBS緩沖液或TES緩沖液(用于重懸病毒)
使用方法：
注意：需要盡量減少含病毒溶液中蛋白的濃度。收集培養(yǎng)細(xì)胞分泌的病毒前，最好換上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培養(yǎng)基。
1、將培養(yǎng)細(xì)胞刮下，和培養(yǎng)基一起全部轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中，10000rpm 4℃離心20分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管中。如果培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)還毒顆粒，并且病毒顆�？梢缘挚箖鋈�，則可以把細(xì)胞凍融數(shù)次，釋放出包漿的病毒，然后再轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中，10000rpm 4℃離心20分鐘。轉(zhuǎn)移上清(含病毒)到新離心管中。如果病毒溶液不含細(xì)胞成分，則直接進(jìn)入下一步。

2、在含病毒的上清中加入1/4總體積的本產(chǎn)品(4mL病毒溶液則加1mL本產(chǎn)品)，4℃冰箱中放置過夜或12小時(shí)以上。病毒在此期間將形成沉淀。

3、10000rpm 4℃離心20分鐘收集病毒沉淀，盡可能棄掉所有上清(可以暫時(shí)保留上清，等確認(rèn)病毒濃縮成功后再丟棄)。

4、將離心管放回離心機(jī)短暫離心數(shù)秒，再次小心去除殘留上清。

5、將沉淀(病毒顆粒)溶于適量預(yù)冷的自備的緩沖液(如PBS緩沖液、TES緩沖液和培養(yǎng)基中，取決于后續(xù)實(shí)驗(yàn))，立即使用或者-20℃長期保存。