基于CytoFLEX mosaic 88的32色光譜流式細胞分析方案

這項研究的背景是什么？
貝克曼庫爾特生命科學與美國麻省理工學院、哈佛大學博德研究所、Luminous Bioanalytical Consulting聯(lián)合開發(fā)了一套基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式細胞分析方案，用于人B細胞亞群的深度免疫表型分析。
該方案覆蓋B細胞的活化、分化及功能相關標志物，并整合了髓系細胞亞群和慢性淋巴細胞白血�。–LL）相關的免疫標志物，能夠繪制完整的免疫圖譜。
 
實驗使用了哪些樣本？

• 冷凍保存的PBMC（外周血單個核細胞）
• 健康供體的骨髓樣本

實驗驗證顯示，該方法適用于臨床樣本的回顧性分析，可從有限樣本中獲取高維免疫信息，對轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究具有實際應用價值。

該方案使用了什么平臺？

• 所有實驗在CytoFLEX mosaic 88光譜檢測模塊上完成。
• 該模塊是CytoFLEX系列最新產(chǎn)品，專為高參數(shù)光譜分析而設計，搭載紫外激光器，支持靈活配置。
• 結(jié)合雙棲光學路徑與雙算法分析引擎，提升多色實驗的精度與穩(wěn)定性。

實驗流程概覽（高亮步驟）
1. 樣本復蘇與細胞處理

• PBMC快速復蘇，離心清洗，使用Cellaca+AOPI染色計數(shù)并調(diào)整濃度。
• 分裝入流式管準備染色。

2. 抗體染色流程

• 進行活性染色、Fc受體封閉、單核細胞阻斷。
• 使用抗IgG抗體及混合抗體孵育并過濾待上機。

3. 設定對照與數(shù)據(jù)采集

• 配置單色對照、未染色對照及活性對照。
• 在mosaic 88模塊進行數(shù)據(jù)采集與分析。

抗體組合和檢測結(jié)果有哪些亮點？

• 32種抗體組合覆蓋關鍵免疫亞群（表詳見附件）。

• 熒光擴散矩陣（SSM）顯示良好的信號分離性。
• 設門邏輯清晰，能夠精準區(qū)分B細胞不同亞群。

實驗結(jié)果圖示

圖1：熒光溢出擴散矩陣（SSM）——展示染料之間的光譜重疊情況。

圖2：細胞設門策略——展示免疫亞群的區(qū)分邏輯與分布。
 
這項方案的優(yōu)勢是什么？

• 可在樣本量受限的情況下實現(xiàn)高維單細胞免疫圖譜構(gòu)建。
• 適用于基礎免疫研究、疾病免疫監(jiān)測及臨床轉(zhuǎn)化研究。
• 基于CytoFLEX mosaic 88的出色光譜分辨能力，提升了高通量流式分析的實用性。

 
結(jié)論總結(jié)
本研究展示了基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式檢測方案的強大性能。其在B細胞高維分析中的應用證明了其在科研和臨床領域的廣泛潛力。
 
“雙擎驅(qū)動，洞見多維” —— CytoFLEX mosaic結(jié)合高靈敏度檢測模塊與智能分析軟件，助力光譜流式技術(shù)突破傳統(tǒng)，開啟更高維度的單細胞免疫探索新時代。
 
如需獲取抗體組合表或原始實驗模板，請聯(lián)系貝克曼庫爾特生命科學團隊。