基于CytoFLEX mosaic 88的32色光譜流式細(xì)胞分析方案

這項(xiàng)研究的背景是什么？
貝克曼庫爾特生命科學(xué)與美國麻省理工學(xué)院、哈佛大學(xué)博德研究所、Luminous Bioanalytical Consulting聯(lián)合開發(fā)了一套基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式細(xì)胞分析方案，用于人B細(xì)胞亞群的深度免疫表型分析。
該方案覆蓋B細(xì)胞的活化、分化及功能相關(guān)標(biāo)志物，并整合了髓系細(xì)胞亞群和慢性淋巴細(xì)胞白血�。–LL）相關(guān)的免疫標(biāo)志物，能夠繪制完整的免疫圖譜。
 
實(shí)驗(yàn)使用了哪些樣本？

• 冷凍保存的PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）
• 健康供體的骨髓樣本

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證顯示，該方法適用于臨床樣本的回顧性分析，可從有限樣本中獲取高維免疫信息，對(duì)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

該方案使用了什么平臺(tái)？

• 所有實(shí)驗(yàn)在CytoFLEX mosaic 88光譜檢測模塊上完成。
• 該模塊是CytoFLEX系列最新產(chǎn)品，專為高參數(shù)光譜分析而設(shè)計(jì)，搭載紫外激光器，支持靈活配置。
• 結(jié)合雙棲光學(xué)路徑與雙算法分析引擎，提升多色實(shí)驗(yàn)的精度與穩(wěn)定性。

實(shí)驗(yàn)流程概覽（高亮步驟）
1. 樣本復(fù)蘇與細(xì)胞處理

• PBMC快速復(fù)蘇，離心清洗，使用Cellaca+AOPI染色計(jì)數(shù)并調(diào)整濃度。
• 分裝入流式管準(zhǔn)備染色。

2. 抗體染色流程

• 進(jìn)行活性染色、Fc受體封閉、單核細(xì)胞阻斷。
• 使用抗IgG抗體及混合抗體孵育并過濾待上機(jī)。

3. 設(shè)定對(duì)照與數(shù)據(jù)采集

• 配置單色對(duì)照、未染色對(duì)照及活性對(duì)照。
• 在mosaic 88模塊進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與分析。

抗體組合和檢測結(jié)果有哪些亮點(diǎn)？

• 32種抗體組合覆蓋關(guān)鍵免疫亞群（表詳見附件）。

• 熒光擴(kuò)散矩陣（SSM）顯示良好的信號(hào)分離性。
• 設(shè)門邏輯清晰，能夠精準(zhǔn)區(qū)分B細(xì)胞不同亞群。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖示

圖1：熒光溢出擴(kuò)散矩陣（SSM）——展示染料之間的光譜重疊情況。

圖2：細(xì)胞設(shè)門策略——展示免疫亞群的區(qū)分邏輯與分布。
 
這項(xiàng)方案的優(yōu)勢是什么？

• 可在樣本量受限的情況下實(shí)現(xiàn)高維單細(xì)胞免疫圖譜構(gòu)建。
• 適用于基礎(chǔ)免疫研究、疾病免疫監(jiān)測及臨床轉(zhuǎn)化研究。
• 基于CytoFLEX mosaic 88的出色光譜分辨能力，提升了高通量流式分析的實(shí)用性。

 
結(jié)論總結(jié)
本研究展示了基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式檢測方案的強(qiáng)大性能。其在B細(xì)胞高維分析中的應(yīng)用證明了其在科研和臨床領(lǐng)域的廣泛潛力。
 
“雙擎驅(qū)動(dòng)，洞見多維” —— CytoFLEX mosaic結(jié)合高靈敏度檢測模塊與智能分析軟件，助力光譜流式技術(shù)突破傳統(tǒng)，開啟更高維度的單細(xì)胞免疫探索新時(shí)代。
 
如需獲取抗體組合表或原始實(shí)驗(yàn)?zāi)０�，�?qǐng)聯(lián)系貝克曼庫爾特生命科學(xué)團(tuán)隊(duì)。