如何有效滅菌培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基？關鍵步驟和注意事項揭秘！

　　培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基的方法滅菌及注意事項
 

　　培養(yǎng)皿分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿，塑料培養(yǎng)皿是一次性的，用完處理后就可以扔了，廠家會對塑料培養(yǎng)皿滅菌之后再進行發(fā)貨，客戶拆開包裝后可直接使用，廠家的滅菌方式一般有射線滅菌和環(huán)氧乙w滅菌;玻璃培養(yǎng)皿是可以重復使用的，需要自行滅菌，實驗室對玻璃培養(yǎng)皿可進行干熱滅菌或濕熱滅菌,干熱滅菌方法就是將培養(yǎng)皿包在鐵質容器內,進行高溫烘烤。濕熱用牛皮紙包起來放在高壓鍋中進行高壓滅菌。培養(yǎng)基一般均采用濕熱滅菌。

　　培養(yǎng)皿滅菌方法有干熱滅菌和濕熱滅菌,干熱滅菌方法：包在鐵質容器內,進行高溫烘烤.濕熱用牛皮紙包起來放在高壓鍋中進行高壓滅菌.培養(yǎng)基滅菌方法有濕熱滅菌、煮沸滅菌和過濾除菌,煮沸滅菌在電磁爐或者微波爐內進行煮沸即可,過濾除菌適用于不能高溫處理的培養(yǎng).

 

　　培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基有效滅菌‌的關鍵步驟與注意事項，綜合實驗室常用方法及操作規(guī)范：

　　一、培養(yǎng)皿滅菌方法‌

　　1. 干熱滅菌法(主流方法)‌

　　步驟‌：

　　將干燥的培養(yǎng)皿用牛皮紙包裹或放入金屬盒中‌。

　　置于烘箱，160–170℃加熱1–2小時‌。

　　滅菌后待溫度降至60℃以下再取出，避免玻璃炸裂‌。

　　適用場景‌：耐高溫玻璃培養(yǎng)皿，可徹底滅活芽孢‌。

　　2. 高壓蒸汽滅菌法(輔助方法)‌

　　步驟‌：

　　使用培養(yǎng)皿滅菌桶(需對齊通氣孔)或雙層報紙包裹‌。

　　121℃、100kPa壓力下滅菌15–30分鐘‌。

　　出鍋時趁熱旋轉桶蓋錯位通氣孔，防止污染‌。

　　適用場景‌：一次性塑料培養(yǎng)皿(需確認材質耐溫性)‌。

　　3. 其他方法‌

　　紫外線/酒精消毒‌：僅表面臨時處理，不可替代高溫滅菌‌。

　　二、培養(yǎng)基滅菌方法‌

　　1. 高壓蒸汽滅菌法(最常用)‌

　　步驟‌：

　　分裝培養(yǎng)基至錐形瓶，密封后放入滅菌鍋‌。

　　121℃、103–137kPa壓力下滅菌15–30分鐘‌。

　　避免過度滅菌導致營養(yǎng)成分(如糖類、維生素)降解‌。

　　驗證‌：使用生物指示劑或化學指示卡監(jiān)測效果‌。

　　2. 過濾除菌法(熱敏成分)‌

　　適用‌：含血清、維生素等易分解物質的培養(yǎng)基‌。

　　操作‌：通過0.22μm濾膜過濾，容器需預先滅菌‌。

　　3. 低溫濕熱滅菌‌

　　參數(shù)‌：115℃處理不耐高溫培養(yǎng)基(如含化學不穩(wěn)定成分)‌。

　　三、關鍵注意事項‌

　　安全操作‌：

　　高壓滅菌鍋需先加水防干燒，壓力歸零后再開閥‌。

　　干熱滅菌后器械需冷卻至安全溫度再取用‌。

　　防污染措施‌：

　　滅菌后培養(yǎng)皿/培養(yǎng)基需在超凈臺中拆封‌。

　　金屬工具(如鑷子)可火焰灼燒輔助滅菌‌。

　　質量控制‌：

　　定期校準滅菌設備溫度與壓力參數(shù)‌。

　　不同批次試劑勿混用，封板膜一次性使用‌。

　　四、方法選擇建議‌

　　對象‌ ‌推薦方法‌ ‌優(yōu)勢‌

　　玻璃培養(yǎng)皿 干熱滅菌(160–170℃)‌ 徹底滅活芽孢，保持干燥

　　耐高溫培養(yǎng)基 高壓蒸汽滅菌(121℃)‌ 穿透力強，時間短

　　熱敏成分培養(yǎng)基 過濾除菌‌ 避免熱破壞

　　通過規(guī)范操作和參數(shù)控制，可確保滅菌效果達到無菌保證水平(SAL≤10⁻⁶)‌。

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