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PBS/Hanks緩沖液的配置方法

瀏覽次數(shù):2029 發(fā)布日期:2021-11-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
實驗時經(jīng)常用到PBS緩沖液,但是很多文獻里面也用到了Hanks緩沖液,不知道這兩種緩沖液在細胞培養(yǎng)方面有什么區(qū)別嗎?也就是說它分別適合于哪些情況?
                     
 
PBS :磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制,因為鈉鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
 
其配置方法如下:采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進行:
 
(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;
 
(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分數(shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;最終 測定PBS液的PH值約為7.4。其作用接近于生理鹽水,但是在實驗室內(nèi)比生理鹽水的用途要廣泛。
 
Hanks:平衡鹽溶液——無機鹽和葡萄糖濃度接近大部分動植物 細胞的水平,可作為動植物細胞短期培養(yǎng)(保存)。 Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l); D-Hank' s:不含鈣離子、鎂離子、葡萄糖。( T7 e# L7 e, K2 N
 
相比較而言,hanks液中鹽成分較PBS 復(fù)雜,且有葡萄糖,可為細胞提供簡單的營養(yǎng),而pbs中只有磷酸根,鈉,鉀,氯離子,只是最jian單的鹽平衡緩沖液,不能為細胞提供暫時的營養(yǎng) 。
 
關(guān)鍵要看你用這些液體來洗細胞還是存儲細胞了。
 
PBS 、hanks各都有兩種,一種是含鈣鎂的,另一種是不含鈣鎂的:DPBS,DHANKS。 r) u7 n6 e3 R% P
 
hanks比PBS成分稍微復(fù)雜點,一般細胞培養(yǎng)時用DPBS就夠,Dhanks一般用到原代細胞消化分離操作實驗中,一般培養(yǎng)用PBS就夠了,感覺DHANKS上場的實驗比較高級點哎,對于保護細胞活力等很有好處。
 
HANKS對細胞略好, 不過一般洗滌等用PBS足夠了。 分離時,兩者皆可, 多數(shù)推薦HANKS,實際上差不多。如果分離時消化時間較長, 建議HANKS
 
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