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功能超聲成像(fUS)解碼非人靈長(zhǎng)類腦中的“運(yùn)動(dòng)傳感器”

瀏覽次數(shù):157 發(fā)布日期:2025-7-30  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
fUS解碼獼猴的“運(yùn)動(dòng)傳感器”
前庭系統(tǒng)在維持平衡、視覺(jué)穩(wěn)定、運(yùn)動(dòng)控制等方面至關(guān)重要,但傳統(tǒng)研究技術(shù)存在局限:功能磁共振成像等非侵入性技術(shù)需要讓被試在掃描儀中固定,無(wú)法通過(guò)真實(shí)身體運(yùn)動(dòng)精準(zhǔn)激活外周前庭器官,只能依賴熱刺激或電流刺激(CVS/GVS),難以模擬自然條件;單細(xì)胞記錄雖時(shí)空分辨率高,但侵入性強(qiáng)且存在采樣偏差。

2025年7月17日,中國(guó)科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心(神經(jīng)科學(xué)研究所)顧勇研究組及合作者在PNAS上發(fā)表了題名為“Robust single-trial decoding of physical self-motion from hemodynamic signals in the brain measured by functional ultrasound imaging”的研究論文。研究通過(guò)功能超聲成像(fUS)技術(shù),在獼猴被動(dòng)接受物理自運(yùn)動(dòng)刺激時(shí),系統(tǒng)探究了大腦中與前庭自身運(yùn)動(dòng)相關(guān)的腦區(qū)。

該研究在腦智卓越中心顧勇研究員的指導(dǎo)下,博士后劉炳煜(現(xiàn)為深圳醫(yī)學(xué)科學(xué)院助理研究員)及博士生羅清楊為共同第一作者,腦智卓越中心梁智鋒團(tuán)隊(duì)也為該研究做出了重要貢獻(xiàn)。

 

研究亮點(diǎn)
高分辨率解碼
首次在單次試驗(yàn)中通過(guò)fUS信號(hào)可靠解碼物理自運(yùn)動(dòng)的方向和類型(準(zhǔn)確率最高93%),時(shí)空分辨率(100 μm, 400 ms)遠(yuǎn)超fMRI。

新腦區(qū)發(fā)現(xiàn)
揭示了傳統(tǒng)方法未明確的前庭相關(guān)區(qū)域(如V3A、M1、7m),拓展了對(duì)多感官整合的理解。

自然條件模擬
通過(guò)物理運(yùn)動(dòng)平臺(tái)選擇性激活前庭器官,克服了電流刺激等方法的非特異性刺激局限。

多模態(tài)驗(yàn)證
結(jié)合視覺(jué)光流實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)12個(gè)雙模態(tài)腦區(qū)(如MSTd、VIP),證實(shí)前庭與視覺(jué)信號(hào)的交互。

技術(shù)突破
fUS兼具高靈敏度(8-58% CBV變化)低侵入性,為在體研究高認(rèn)知功能(如導(dǎo)航、決策)提供了新工具。

研究結(jié)果
為測(cè)量前庭相關(guān)信號(hào),研究人員將一個(gè)15.6 MHz超聲探頭固定在兩只獼猴頭部,同時(shí)通過(guò)六自由度運(yùn)動(dòng)平臺(tái)對(duì)它們施加正弦平移或旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)(圖1A和B)。通過(guò)超聲圖像捕捉血流容積變化,空間分辨率為100×100 µm,冠狀面成像切片厚度為400 µm。以1 mm 步長(zhǎng)連續(xù)獲取圖像,覆蓋范圍主要集中于兩只動(dòng)物右側(cè)頂葉和顳葉皮層區(qū)域(獼猴W:前囟坐標(biāo)AP 4至25;獼猴J:前囟坐標(biāo)AP -3至12,圖1C)。

 
圖1. 被動(dòng)物理自運(yùn)動(dòng)刺激的實(shí)驗(yàn)裝置及fUS信號(hào)。
 
(A)行為實(shí)驗(yàn)與fUS裝置。獼猴通過(guò)運(yùn)動(dòng)平臺(tái)接受被動(dòng)物理自運(yùn)動(dòng)刺激。超聲探頭固定于硬腦膜附著腔室,腔內(nèi)填充超聲耦合劑。步進(jìn)電機(jī)以1毫米步長(zhǎng)沿前囟軸連續(xù)成像。(B)平移和旋轉(zhuǎn)條件下平臺(tái)運(yùn)動(dòng)速度曲線。平臺(tái)以0.5Hz正弦式運(yùn)動(dòng),速度呈高斯分布。(C)獼猴J的fUS成像示例。上圖:冠狀面MRI顯示藍(lán)色fUS成像范圍。下圖:fUS圖像與MRI疊加,白色區(qū)域顯示血管分布。(D)兩只獼猴的激活圖譜(FDR校正后P<0.001的相關(guān)性系數(shù)疊加于平均fUS圖像)。(E)各腦區(qū)ROI的Pearson相關(guān)系數(shù)。(F)選定ROI(D中白框)的CBV響應(yīng)曲線(藍(lán)色陰影為6秒刺激時(shí)段,右側(cè)為試次平均)。(G)E中相同ROI的CBV信號(hào)比較。(H)所有ROI的CBV變化與相關(guān)系數(shù)相關(guān)性。

運(yùn)動(dòng)刺激誘發(fā)的fUS信號(hào)

在完全黑暗環(huán)境中,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以0.5 Hz頻率被動(dòng)接受正弦平移或旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)(圖1B)。每次刺激持續(xù)6秒,間隔10秒后開始下一次試驗(yàn)。每種刺激條件(側(cè)向/前后平移或垂直軸旋轉(zhuǎn))在每個(gè)實(shí)驗(yàn)session中重復(fù)20次。

基于原始fUS信號(hào),通過(guò)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)多個(gè)腦區(qū)存在顯著激活模式(圖1D)。這些區(qū)域與傳統(tǒng)前庭相關(guān)區(qū)(如PIVC、2v、3a、MSTd等)高度重疊(圖1E),同時(shí)在新區(qū)域(5區(qū)、1-2區(qū)、M1、V3A、7m等)也觀察到顯著激活。

通過(guò)劃定10×10體素的ROI(圖1D白框),計(jì)算相對(duì)于基線(刺激前3.2秒均值)的CBV百分比變化(圖1F)。最大CBV變化達(dá)8.9-58.6%,信噪比優(yōu)異。由于血流動(dòng)力學(xué)延遲,峰值出現(xiàn)在第11幀(4.25±0.08秒),故選取8-13幀(2.4秒)進(jìn)行跨區(qū)域比較(圖1G)。3a、M1等區(qū)域調(diào)制強(qiáng)度最高,且與相關(guān)性分析結(jié)果呈正趨勢(shì)(r=0.73,圖1H)。

通過(guò)跨日重復(fù)實(shí)驗(yàn)(68.5%像素相關(guān)性重疊)、數(shù)據(jù)重采樣和激活體素比例量化,驗(yàn)證了信號(hào)的穩(wěn)定性。對(duì)照實(shí)驗(yàn)排除了眼動(dòng)(通過(guò)部分相關(guān)分析和固視訓(xùn)練)和平臺(tái)噪音(90dB聲音回放)的干擾,證實(shí)fUS信號(hào)主要源于物理運(yùn)動(dòng)刺激。

這些結(jié)果表明 fUS 可在真實(shí)運(yùn)動(dòng)條件下穩(wěn)健捕捉前庭相關(guān)腦活動(dòng),為研究前庭系統(tǒng)提供了新方法。

物理自運(yùn)動(dòng)刺激的單次試次解碼
為評(píng)估fUS信號(hào)區(qū)分不同自運(yùn)動(dòng)刺激的精度,在每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)塊中設(shè)置兩種運(yùn)動(dòng)方向(側(cè)向與前后軸),以6秒時(shí)長(zhǎng)隨機(jī)交替呈現(xiàn),每種條件重復(fù)約200次(共400試次)。均值分析顯示不同運(yùn)動(dòng)方向的fUS信號(hào)存在顯著差異,為解碼奠定基礎(chǔ)。

研究人員基于前人研究開發(fā)了單試次解碼算法(圖2A):先對(duì)圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行基線校正和跨試次歸一化,再采用線性判別分析(LDA)分類運(yùn)動(dòng)方向,并通過(guò)10折交叉驗(yàn)證防止過(guò)擬合。結(jié)果顯示,兩只獼猴均能實(shí)現(xiàn)可靠單試次解碼(圖2B):獼猴J解碼準(zhǔn)確率顯著高于隨機(jī)水平(P<0.001),峰值達(dá)74.12%;獼猴W同樣保持全程顯著,峰值78.5%?鐣r(shí)間解碼分析(圖2C)表明解碼效能集中于刺激時(shí)段,排除了歷史數(shù)據(jù)或預(yù)期信號(hào)的干擾。訓(xùn)練集規(guī)模測(cè)試顯示(圖2D),當(dāng)試次超過(guò)31次(獼猴J)或39次(獼猴W)時(shí),解碼準(zhǔn)確率顯著提升,峰值分別達(dá)82.1%和76.95%。

通過(guò)搜索光分析法(1.2秒窗口,400ms步進(jìn))發(fā)現(xiàn)MSTd、PCC等腦區(qū)具有穩(wěn)定解碼能力。進(jìn)一步對(duì)平移(刺激耳石器)與旋轉(zhuǎn)(刺激半規(guī)管)運(yùn)動(dòng)類型解碼時(shí)(圖2E),準(zhǔn)確率峰值達(dá)93%,且刺激結(jié)束后仍維持較長(zhǎng)時(shí)間顯著(圖2F)。訓(xùn)練集達(dá)75次時(shí)準(zhǔn)確率達(dá)94.5%平臺(tái)期(圖2G),LIP等區(qū)域表現(xiàn)突出。眼動(dòng)數(shù)據(jù)解碼準(zhǔn)確率顯著低于fUS信號(hào)(獼猴J:平移方向63.31%,運(yùn)動(dòng)類型75.49%),再次驗(yàn)證fUS信號(hào)的特異性。

這些發(fā)現(xiàn)不僅證實(shí)fUS具備單試次神經(jīng)解碼的靈敏度,更揭示了前庭系統(tǒng)在皮層表征的精細(xì)化組織模式,為開發(fā)腦機(jī)接口和臨床前庭功能障礙診斷提供了新方法論。該技術(shù)的實(shí)時(shí)性優(yōu)勢(shì)(400ms時(shí)間分辨率)使其在自然行為范式研究中具有獨(dú)特價(jià)值。

 

圖2. 基于單試次的運(yùn)動(dòng)方向與類型解碼。

(A)LDA算法流程圖:fUS圖像經(jīng)預(yù)處理后采用k折交叉驗(yàn)證。(B-D)運(yùn)動(dòng)方向解碼結(jié)果:(B)時(shí)間解碼準(zhǔn)確率曲線(藍(lán)色線為真實(shí)數(shù)據(jù),灰線為100次置換檢驗(yàn)均值)。(C)跨時(shí)間解碼矩陣。(D)訓(xùn)練試次數(shù)與準(zhǔn)確率關(guān)系(藍(lán)/紫線為兩只獼猴,紅線為眼動(dòng)數(shù)據(jù)解碼)。(E-G)運(yùn)動(dòng)類型解碼:(E)時(shí)間準(zhǔn)確率曲線,(F)跨時(shí)間解碼矩陣,(G)訓(xùn)練試次數(shù)與準(zhǔn)確率關(guān)系。

與GVS條件的對(duì)比研究
前人在無(wú)法進(jìn)行物理運(yùn)動(dòng)刺激的fMRI/PET/MEG研究中,常采用電流前庭刺激(GVS)作為替代方案。為對(duì)比兩種刺激模式的神經(jīng)響應(yīng)差異,研究人員在運(yùn)動(dòng)平臺(tái)靜止?fàn)顟B(tài)下,通過(guò)GVS技術(shù)對(duì)獼猴進(jìn)行刺激:將電極非侵入式貼附于雙耳乳突,施加±2.5mA、2Hz的交流電,每次刺激6秒(間隔10秒),參數(shù)設(shè)計(jì)與物理運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)匹配。

fUS成像顯示,GVS可穩(wěn)定激活多個(gè)腦區(qū)(圖3B),其CBV變化模式與物理運(yùn)動(dòng)相似(圖3C-D)。激活區(qū)域包含經(jīng)典前庭區(qū)(2v、3a、MSTd等)及兩個(gè)新區(qū)域(5區(qū)、1-2區(qū))(圖3E)。但定量分析發(fā)現(xiàn):1)物理運(yùn)動(dòng)的CBV變化幅度顯著更大(圖3F,P<0.001);2)不同腦區(qū)的Pearson相關(guān)系數(shù)存在差異(圖3G);3)GVS的峰值響應(yīng)延遲更長(zhǎng)(7.25±0.37秒 vs 物理運(yùn)動(dòng)4.25±0.08秒,P<0.001)。

該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了fUS技術(shù)與傳統(tǒng)成像研究的一致性,但GVS未能激活物理運(yùn)動(dòng)特有的V3A、M1和7m區(qū)。差異可能源于:①GVS參數(shù)(電流強(qiáng)度/頻率/位置)影響激活效果;②GVS同時(shí)刺激全部前庭終末器官,而物理運(yùn)動(dòng)可選擇性激活特定器官(如水平耳石器);③物理運(yùn)動(dòng)伴隨體感/運(yùn)動(dòng)補(bǔ)償信號(hào),形成多模態(tài)混合響應(yīng)。

這些發(fā)現(xiàn)不僅驗(yàn)證了fUS技術(shù)相比傳統(tǒng)成像方法的敏感性(如檢出GVS相關(guān)研究中未報(bào)告的腦區(qū)),更揭示了自然運(yùn)動(dòng)條件下前庭系統(tǒng)神經(jīng)表征的獨(dú)特性,為臨床前庭功能障礙的精準(zhǔn)評(píng)估提供了新見(jiàn)解。

 

圖3. GVS實(shí)驗(yàn)。(A)實(shí)驗(yàn)裝置及刺激參數(shù)(±2.5mA,2Hz)。(B)GVS激活圖譜(FDR校正P<0.001)。(C)選定ROI的CBV響應(yīng)(灰色陰影為6秒刺激)。(D)試次平均CBV信號(hào)。(E)不同技術(shù)激活腦區(qū)對(duì)比。(F-G)物理運(yùn)動(dòng)與GVS的CBV變化(F)和相關(guān)系數(shù)(G)比較。

對(duì)物理運(yùn)動(dòng)和光流刺激均響應(yīng)的多感覺(jué)腦區(qū)
作為自運(yùn)動(dòng)感知的重要信息來(lái)源,光流(optic flow)與慣性運(yùn)動(dòng)共同調(diào)制多個(gè)腦區(qū)。為探究前庭相關(guān)區(qū)域是否同時(shí)響應(yīng)視覺(jué)運(yùn)動(dòng),研究人員采用高斯速度輪廓的光流刺激(90°×90°顯示屏,圖4A),在獼猴固視狀態(tài)下記錄fUS信號(hào)。

研究發(fā)現(xiàn):1)頂葉區(qū)(MSTd、VIP、LIP等)和經(jīng)典前庭區(qū)(3a、2v、PIVC)均對(duì)光流產(chǎn)生顯著響應(yīng);2)首次在1-2區(qū)、M1、F2等動(dòng)作相關(guān)區(qū)域發(fā)現(xiàn)視覺(jué)運(yùn)動(dòng)激活(可能與視覺(jué)引導(dǎo)行為相關(guān))。共鑒定出12個(gè)雙模態(tài)腦區(qū)(如V3A、7a、MIP等),其前庭刺激的CBV變化更強(qiáng)(P=0.0063,圖4B),而視覺(jué)刺激的信號(hào)相關(guān)性略高(P=0.053,圖4C)。

特別值得注意的是,同一腦區(qū)內(nèi)存在響應(yīng)異質(zhì)性。例如在5區(qū)(按Pandya分區(qū)),前庭信號(hào)廣泛分布于PE前部至PEa/PEip前段(AP0至+8),而視覺(jué)信號(hào)僅出現(xiàn)在PEa/PEip最前段(AP+8)(圖4D),提示功能亞區(qū)可能存在模態(tài)特異性處理。

這些發(fā)現(xiàn)不僅拓展了對(duì)多感官整合通路的認(rèn)識(shí),更說(shuō)明fUS技術(shù)能有效捕捉不同模態(tài)神經(jīng)表征的精細(xì)差異,為研究感知-動(dòng)作協(xié)調(diào)的神經(jīng)機(jī)制開辟了新途徑。

 

圖4. 光流與物理運(yùn)動(dòng)共激活腦區(qū)。(A)視覺(jué)刺激裝置(90°×90°顯示屏)與高斯速度曲線。(B-C)前庭與視覺(jué)條件的CBV變化(B)和相關(guān)系數(shù)(C)對(duì)比。(D)典型腦區(qū)激活圖譜(上圖視覺(jué),下圖前庭)。
 

研究總結(jié)
本研究首次利用功能超聲成像(fUS)技術(shù),在自然運(yùn)動(dòng)條件下實(shí)現(xiàn)了獼猴全腦前庭信號(hào)的高分辨率(100μm/400ms)檢測(cè)。通過(guò)物理運(yùn)動(dòng)平臺(tái)精確刺激前庭器官,成功在單試次水平解碼運(yùn)動(dòng)方向(峰值78.5%)和類型(93%),并發(fā)現(xiàn)12個(gè)新的多感覺(jué)整合腦區(qū)


相比傳統(tǒng)GVS方法,fUS揭示了更完整的神經(jīng)表征圖譜,包括V3A、M1等新功能區(qū)。該技術(shù)突破fMRI的空間限制,為研究自然行為下的前庭-視覺(jué)整合機(jī)制提供了革命性工具,對(duì)腦機(jī)接口和眩暈癥診療具有重要價(jià)值。

參考文獻(xiàn)
Liu B, Luo Q, Liang Z, He H, Gu Y. Robust single-trial decoding of physical self-motion from hemodynamic signals in the brain measured by functional ultrasound imaging. Proc Natl Acad Sci U S A. 2025 Jul 22;122(29):e2414354122. doi:10.1073/pnas.2414354122. 


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