大小鼠曠場實驗（Open Field Test）原理及步驟

一、實驗原理​​
曠場實驗是一種經(jīng)典的行為學測試方法，主要用于評估嚙齒類動物（大鼠/小鼠）的焦慮樣行為和探索行為。
其原理基于：
1.性與環(huán)境沖突：嚙齒類動物對新異環(huán)境具有天生的恐懼（傾向于躲避開放、明亮區(qū)域），同時具有探索新環(huán)境的本能。
2.​焦慮與探索的權衡：焦慮水平高的動物會更多時間停留在邊緣區(qū)域（“安全區(qū)”），減少進入中央開放區(qū)域的探索行為；反之，低焦慮動物會更多探索中心區(qū)域。
3.​運動活性：通過總移動距離和速度反映動物的活動水平，常用于評估藥物或應激對運動功能的影響。

​二、實驗步驟​​
​1.實驗前準備​​
​ 設備：曠場裝置通常為正方形（大鼠：100×100 cm；小鼠：40×40 cm）或圓形場地，底部劃分網(wǎng)格或顏色分區(qū)，周圍有圍欄防止逃跑。部分裝置配備攝像頭和追蹤軟件（如EthoVision）。
環(huán)境控制​：保持恒溫（22±1℃）、低光照（大鼠：約100 lux；小鼠：約50 lux），減少噪音干擾。
​​清潔​：每次測試前用75%乙醇擦拭場地，避免氣味殘留影響后續(xù)測試。
​2.適應與測試​​
​​適應期​​（可選）：將動物置于測試間外靜置1-2小時，減少應激。
​​放置動物​​：將動物輕柔置于場地邊緣固定起始點（如角落），面向墻壁。
​​記錄參數(shù)​​：
​​1.總移動距離​​：反映運動活性。
2.​​中央?yún)^(qū)停留時間​​：中央?yún)^(qū)域占比（如大鼠中央20×20 cm區(qū)域）。
​​3.直立次數(shù)​：（前爪抬起）：探索行為的指標。
​​4.速度​​：運動活躍度。
​​5.首次進入中央?yún)^(qū)潛伏期​​：焦慮程度的敏感指標。

3. 數(shù)據(jù)分析​​
對比不同組別（如藥物處理組 vs. 對照組）的中央?yún)^(qū)停留時間、移動距離等差異。

​三、注意事項​​
1.​環(huán)境一致性​：同一實驗中所有測試條件（光照、溫度、清潔劑）需嚴格統(tǒng)一。
2.​動物狀態(tài)​：
避免在動物飽食、哺乳期或疾病狀態(tài)下測試。
測試間隔至少24小時（多次測試時）。
3.​人為干擾​：測試者需遠離場地，避免噪音或動作干擾動物。
4.​數(shù)據(jù)標準化​：剔除異常數(shù)據(jù)（如跌倒、過度理毛導致的數(shù)據(jù)偏差）。

四、應用與變種​​
​藥物篩選​​：評估抗焦慮藥（如BDZ類藥物）或精神興奮劑（如安非他命）的效果。
​應激模型​​：結合慢性應激實驗，研究抑郁/焦慮行為。
​變種​​：
​帶威脅刺激的曠場​​（如頂部強光、電擊墊）增強焦慮誘導。
​曠場結合其他測試​​（如高架十字迷宮）提高行為評估的效度。

五、常見問題​
Q.：動物總在邊緣活動是否一定代表高焦慮？
A.：需結合其他指標（如直立次數(shù)、中央?yún)^(qū)進入次數(shù)）綜合判斷，邊緣活動也可能反映高警覺性而非焦慮。
Q：測試時長如何選擇？
A：常用5-30分鐘，一般5-10分鐘即可穩(wěn)定反映行為差異，過長可能導致疲勞。