細(xì)胞轉(zhuǎn)移

細(xì)胞轉(zhuǎn)移

服務(wù)流程

服務(wù)說明

 
細(xì)胞運動性的研究，尤其是在腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移中應(yīng)用很廣泛。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤生物學(xué)特征之一，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的某些階段，腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出較強的運動能力，如腫瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤灶分離，進(jìn)而侵入到鄰近組織及再穿過血管壁進(jìn)入血液循環(huán)和穿出血管壁進(jìn)入繼發(fā)部位等，因而細(xì)胞運動性的研究在弄清腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的機制上有重要位置。 
 

腫瘤運動性的研究方法主要是體外檢測腫瘤細(xì)胞主動移行的能力，一般有劃痕實驗、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移（transwell）實驗等。 

 

細(xì)胞劃痕

是測定了腫瘤細(xì)胞的運動特性的方法之一，借鑒體外細(xì)胞致傷愈合實驗?zāi)Ｐ�，在體外培養(yǎng)的單層細(xì)胞上，劃痕致傷，然后通過藥物或者干擾手段觀察腫瘤細(xì)胞遷移的能力。  
 

吉凱實驗實例： 
針對目的基因的shRNA靶點病毒或?qū)φ詹《靖腥綡epG2細(xì)胞，四天后，在96孔板中鋪細(xì)胞50000細(xì)胞，次日待細(xì)胞貼壁后用槍頭均勻劃傷，用PBS洗盡劃痕時殘余細(xì)胞，以無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，檢測細(xì)胞不同時間的劃痕愈合情況，從而篩選出運動細(xì)胞發(fā)生變化的實驗組。
  
對照組：感染陰性對照慢病毒細(xì)胞；
處理組：感染針對目的基因的shRNA慢病毒細(xì)胞
結(jié)論：降低目的基因的表達(dá)后，細(xì)胞運動能力減弱。 
 

誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移 
將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運動等的影響。常用普通transwell小室（遷移實驗）和鋪有基質(zhì)的transwell小室（侵襲實驗）兩種方式。
遷移實驗通常選擇帶有8.0µm微孔的聚碳酸酯膜小室，上室鋪細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，定量進(jìn)入下室的細(xì)胞可反映細(xì)胞的遷移能力。侵襲實驗與遷移實驗不同的是，在聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪上一層基質(zhì)膠，用以模仿體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)，細(xì)胞欲進(jìn)入下室，先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）將基質(zhì)膠降解，方可通過，定量進(jìn)入下室的細(xì)胞可反映腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。 
 

吉凱應(yīng)用實例： 
1、遷移實驗： 
 
 

不同的方式處理乳腺癌細(xì)胞MCF7后，細(xì)胞的運動能力發(fā)生改變。
 

2 、侵襲實驗  
 
對照組：感染陰性對照慢病毒細(xì)胞；處理組：感染目的基因shRNA靶點慢病毒細(xì)胞
結(jié)論：RNA干擾后細(xì)胞運動能力減弱。
 

上海吉凱基因化學(xué)技術(shù)有限公司 
地址：上海張江高科技園區(qū)愛迪生路332號 郵編：201203 
電話：8621 5132 0189
傳真: 86-21-51370635
售前熱線：800 720 0302
售后熱線：400 621 0302
辦公郵箱：service@genechem.com.cn   
URL: http://www.genechem.com.cn