使用VisuTrack條件性場(chǎng)景恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢測(cè)小鼠恐懼記憶形成機(jī)制

實(shí)驗(yàn)方法

• 場(chǎng)景前置性條件恐懼記憶測(cè)試

包括３個(gè) 部分。①前置場(chǎng)景：即場(chǎng)景的提前接觸。將老年及成年小鼠各 １５ 只分別置于測(cè)試 盒內(nèi)停留 ５ ｍｉｎ。 ②即刻電擊訓(xùn)練：前置場(chǎng) 景２４ｈ后，將 小 鼠 置 于 同 一測(cè)試盒內(nèi)，并在５ｓ內(nèi)給予快速的足底電擊 （２ｓ， ０．７５ｍＡ），電擊結(jié)束后小鼠在測(cè)試盒內(nèi)停留１ｍｉｎ 后放回飼養(yǎng)籠。③測(cè) 試：足 底 電 擊２４ｈ后，再 將 小 鼠置于同一測(cè) 試 盒 內(nèi) 停 留３ｍｉｎ，測(cè)試其對(duì)該場(chǎng)景 的恐懼反應(yīng)。在實(shí)驗(yàn)過 程 中，取 Ｃ５７Ｂｌ６Ｊ野 生 型 老 年小鼠及成年小鼠各１５只，分別給予場(chǎng)景前置性條 件恐懼記憶測(cè)試；老年及成年小鼠各１５只，雌雄各 半，隨機(jī)分為兩組，實(shí)驗(yàn)組（ｎ＝８）在場(chǎng)景前置前和即 刻電擊前２０ｍｉｎ分別給予４－ＡＰ（１ｍｇ／ｋｇ）急性腹 腔注射，對(duì)照組（ｎ＝７）則在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)給予等量 的生理鹽水腹腔注射，分別給予場(chǎng)景前置性條件恐懼記憶測(cè)試。
條件性恐懼實(shí)驗(yàn)，型號(hào)：XR-XC404，上海欣軟

• 條件性場(chǎng)景恐懼記憶測(cè)試

包括兩個(gè)部分。 ①訓(xùn)練：將小鼠置于測(cè)試盒內(nèi)，２ｍｉｎ后給予足底電 擊（２ｓ，０．７５ｍＡ），電擊結(jié)束后讓小鼠在測(cè)試盒內(nèi) 停留３ｍｉｎ后放回飼養(yǎng)籠。②測(cè)試：３０ｍｉｎ及２４ｈ 后，將小鼠置于同一測(cè)試盒內(nèi)，測(cè)試其對(duì)該場(chǎng)景的恐 懼反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)過程中，取老年小鼠３０只，隨機(jī)分為兩 組。實(shí)驗(yàn)前２０ｍｉｎ，實(shí)驗(yàn)組（ｎ＝１５）給予４－ＡＰ（１ｍｇ／ ｋｇ）急性腹腔注射，對(duì)照組（ｎ＝１５）給予等量的生理鹽 水腹腔注射，分別進(jìn)行條件性場(chǎng)景恐懼記憶測(cè)試。

• 條件性聲音恐懼記憶測(cè)試

包括兩個(gè)部分。 ①訓(xùn)練：將小鼠置于測(cè)試盒Ａ內(nèi)，２min后給予聲音刺激（2800Ｈｚ，85ｄＢ，30ｓ），28s后給予足底電擊 （2s，0.75 ｍＡ），電擊與聲音 刺激同時(shí)結(jié)束。小鼠在測(cè)試盒內(nèi)停留1min后放回飼養(yǎng)籠。② 測(cè)試： 30min及24h后，再將小鼠置于另一新的測(cè)試盒Ｂ內(nèi)，2min后給予同樣的聲音刺激，聲音刺激持續(xù) 1min，測(cè)試其對(duì)該聲音的恐懼反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)過程中， 取老年小鼠３０只，隨機(jī)分為兩組。實(shí)驗(yàn)前20ｍｉｎ， 實(shí)驗(yàn)組（ｎ＝１５）給 予 ４－ＡＰ（1mg／kg）急性腹腔注射，對(duì)照組（ｎ＝１５）給予等量的生理鹽水腹腔注射， 分別進(jìn)行條件性聲音恐懼記憶測(cè)試。

檢測(cè)指標(biāo)

采用條件恐懼記憶測(cè)試系統(tǒng)及分析軟件（購自 上海欣軟，VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件），測(cè)試中自動(dòng)記錄小鼠的僵直時(shí)間（小鼠對(duì)該場(chǎng)景有恐懼記憶，則會(huì)表現(xiàn)出自發(fā)活動(dòng)減少或停止，一切自發(fā)活動(dòng)停止的時(shí)間連 續(xù)超過１ｓ，稱為僵直時(shí)間）及總測(cè)試時(shí)間，采用僵直 時(shí)間占總測(cè)試時(shí)間的百分比（僵直時(shí)間％）來表示小鼠的恐懼程度，僵直時(shí)間長(zhǎng)短與恐懼記憶的強(qiáng)弱呈 正比。基礎(chǔ)僵直時(shí)間％：實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，在前置場(chǎng)景中，小鼠放入測(cè)試盒內(nèi)，所測(cè)得其在該場(chǎng)景內(nèi)的僵直 時(shí)間％；電擊后僵直時(shí)間％：對(duì)小鼠進(jìn)行電擊后，所測(cè) 得的其在該場(chǎng)景內(nèi)的即刻僵直時(shí)間％；３０min或２４ｈ后僵直時(shí)間％：３０min或２４ｈ后，再將小鼠置于同一 測(cè)試盒內(nèi)，所測(cè)得的其在該場(chǎng)景內(nèi)僵直時(shí)間％。

以前的研究表明，與場(chǎng)景前置性條件恐懼記憶 的形成絕對(duì)依賴于海馬不同，傳統(tǒng)的條件性場(chǎng)景及 聲音恐懼記憶的形成依賴于海馬及杏仁核神經(jīng)環(huán)路，海馬受損時(shí)仍可依賴杏仁核的功能來形成 完整的對(duì)特定場(chǎng)景的恐懼記憶。依據(jù)這一特點(diǎn)，本文觀察了老年小鼠條件性場(chǎng)景及聲音恐懼記憶能力，結(jié)果顯示，老年小鼠的基礎(chǔ)僵直時(shí)間％、30min后以及24h后僵直時(shí)間％比較差異有顯著性，說明 老年小鼠無條件性場(chǎng)景及聲音恐懼記憶障礙。同時(shí)，本文結(jié)果還顯示，腹腔注射４－ＡＰ對(duì)老年小鼠條件性場(chǎng)景及聲音兩種形式的短期恐懼記憶（30min后僵直時(shí)間％）及長(zhǎng)期恐懼記憶 （24ｈ后僵直時(shí)間％）均無影響。說明老年小鼠可以依賴杏仁核來 完成對(duì)傳統(tǒng)的條件場(chǎng)景及聲音恐懼記憶，隨著年齡 的增加海馬受損對(duì)該記憶的形成無影響；并且４－ＡＰ對(duì)老年小鼠這兩種場(chǎng)景記憶的形成無作用。
 

上海欣軟是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的的高新技術(shù)企業(yè)，是專業(yè)的動(dòng)物行為視頻分析方案解決商。我司專注于動(dòng)物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)產(chǎn)品的研究且致力于向高校、科研機(jī)構(gòu)等領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室一體化方案，業(yè)務(wù)范圍遍布全國(guó)上百家實(shí)驗(yàn)室。公司主營(yíng)產(chǎn)品均為自主開發(fā), 擁有100%核心技術(shù)，同時(shí)公司擁有數(shù)位動(dòng)物行為學(xué)儀器行業(yè)從事10年以上的資深服務(wù)工程師，可為我們的產(chǎn)品提供全方案的售前及售后服務(wù)。我司開發(fā)的儀器設(shè)備都是科學(xué)研究所必備且不可替代的。

動(dòng)物行為分析軟件：

1、VisuTrack軟件

2、SuperMaze軟件

3、FishTrack斑馬魚分析軟件

動(dòng)物行為儀器：

1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射（PPI）、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮、開敞箱等

2、動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀

3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析（內(nèi)測(cè)中）

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等

神經(jīng)電生理：

1、光遺傳、無線光遺傳

2、光纖記錄系統(tǒng)（單通道、多通道）

3、電生理信號(hào)采集系統(tǒng)（腦電、肌電等）