Pipetty電動移液器在細菌內毒素檢查法中的應用

 
 

• 制備陽性對照溶液

• 取內毒素標準品5EU/ml一支，并加入1000μl檢查用水。
• 在漩渦混合器上混勻15min。
• 計算根據(jù)鱟試劑的靈敏度λ（如0.25EU/ml），用檢查用水將內毒素標準溶液稀釋成2λ。

 
 
 
（二）制備供試品溶液
1.計算有效稀釋倍數(shù)（MVD）
MVD=cL/λ
L為樣品的細菌內毒素限值（如葡萄糖注射液為0.5EU/ml）
c為供試品的濃度（如葡萄糖注射液為1.0ml/ml）
λ為鱟試劑的靈敏度（設為0.25EU/0.1ml）
MVD=1.0*0.5/0.25=2（倍）
2.取供試品500μl，加入檢測用水500μl，混合均勻備用。
（三）制備樣品陽性對照溶液
1.取供試品溶液250μl，加入250μl檢查用水混合均勻，制成樣品的2倍稀釋液。2.將上述稀釋液與0.5EU/ml的內毒素溶液500μl混勻備用。
 

• 鱟試劑的準備

準備鱟試劑（0.25EU/0.1ml）8支，并向每支鱟試劑中加入100μl檢查用水混勻備用。
 

• 加樣

 根據(jù)下表加樣。
加樣表2
 
（六）檢測
加樣完畢后輕輕混勻，用封口膜密封試管口，置于37℃恒溫器中保溫1h觀察結果。
 
（七）結果判定
將安瓿輕輕取出，緩緩倒轉180°，若管內形成凝膠并且凝膠不變型、不滑落者為陽性。相反，則為陰性。當陰性對照組均為陰性，供試品陽性對照組均為陽性，陽性對照組均為陽性，試驗有效。