細(xì)胞技術(shù)專(zhuān)題：細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)

2.  稱(chēng)取0.5克PEG（MW=4 000）放入試管內(nèi)，在酒精燈上融化之，迅速加入0.5 ml 預(yù)熱的Hanks液混勻制成50%的PEG溶液。放入37℃水浴中待用。

3.  取上述10%的雞紅細(xì)胞懸液1 ml 放入離心管中，再加入5 ml Hanks液混勻，然后以1 000 rpm 離心5分鐘，小心棄去上清，用指彈法將細(xì)胞團(tuán)塊彈散。

4.  取上述50%PEG溶液0.5 ml，在1分鐘內(nèi)滴加到雞紅細(xì)胞懸液，邊加邊輕輕搖動(dòng)混勻。待PEG全部加入后靜置1分鐘左右。此全部過(guò)程都要求在37℃水浴內(nèi)進(jìn)行。

5.  緩慢滴加9 ml Hanks液以終止PEG的作用，在37℃水浴內(nèi)靜置5分鐘。

6.  離心棄上清后，取一滴融合后的細(xì)胞懸液滴片，加蓋片鏡檢。

7.  結(jié)果觀(guān)察：在高倍鏡下可以看到有兩個(gè)或兩個(gè)以上的雞紅細(xì)胞膜融合在一起，形成一個(gè)異核體細(xì)胞。要注意辨別融合細(xì)胞與重疊的雞紅細(xì)胞。

8.  融合率的計(jì)算：在高倍鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞（包括融合的與未融合的細(xì)胞），以融合細(xì)胞（含兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞核的細(xì)胞）的細(xì)胞核數(shù)除以總細(xì)胞核數(shù)（包括融合與未融合的細(xì)胞核）即得出融合率。公式如下：