組織蛋白酶H檢測試劑盒測定目的及步驟

 ELISA即酶聯(lián)吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測定方法。

ELISA免疫測定的目的：
1.測定體液中的各種蛋白質(zhì)，包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等；
2.測定激素，包括小分子量的甾體激素等；
3.測定抗生素和藥物；
4.測定病原體抗原，HBsAg、HBeAg等；
5.利用純化的抗原檢測標(biāo)本中的抗體，例如抗-HBs等；
 
ELISA免疫測定步驟：
1.包被
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)；
3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘；
5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml；
6.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值。