蛋白質(zhì)印跡WB蛋白質(zhì)樣品制備與轉(zhuǎn)膜詳解

二、轉(zhuǎn)膜

1. 將膠浸于轉(zhuǎn)移緩沖液中平衡 10min。 注意：若檢測(cè)小分子蛋白，可省略此步，因小分子蛋白容易擴(kuò)散出膠。
2. 依據(jù)膠的大小剪取膜和濾紙6 片， 放入轉(zhuǎn)移緩沖液中平衡10min。 如用PVDF 膜需用純甲醇浸泡飽和 3-5 秒鐘。
3. 裝配轉(zhuǎn)移三明治:海綿3層濾紙膠膜，3層濾紙海綿，每層放好后，用試管趕去氣泡。切記:膠放于負(fù)極面(黑色面)。
4. 將轉(zhuǎn)移槽置于冰浴中，放入三明治(黑色面對(duì)黑色面)，加轉(zhuǎn)移緩沖液， 插上電極，100V，1h(電流約為 0.3A)。
5. 轉(zhuǎn)膜結(jié)束后，切斷電源，取出雜交膜。