ELISA試劑盒特點(diǎn)與樣本處理要求介紹

ELISA是酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。

一、ELISA試劑盒特點(diǎn)：

1、特異性

ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分，抗體對(duì)有關(guān)。若抗體對(duì)中為多抗，另一個(gè)有必要為單抗，建議運(yùn)用雙單抗。挑選一個(gè)好的ELISA試劑盒，咱們首先要考慮的就是特異性。

2、靈敏度

ELISA試劑盒的好壞往往就取決于靈明度的高低，因而靈敏度也是咱們挑選ELISA試劑盒的一個(gè)重要技術(shù)參數(shù)。靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的才能，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選合適的試劑盒，假如待檢目標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可挑選高敏的ELISA試劑盒。

3、重復(fù)性

科學(xué)實(shí)驗(yàn)講究重復(fù)性，一般 ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。
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二、樣本要求:

1．樣本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

三、樣本處理及要求：

1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。