ELISA試劑盒特點與樣本處理要求介紹

ELISA是酶聯(lián)免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。

一、ELISA試劑盒特點：

1、特異性

ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分，抗體對有關(guān)。若抗體對中為多抗，另一個有必要為單抗，建議運用雙單抗。挑選一個好的ELISA試劑盒，咱們首先要考慮的就是特異性。

2、靈敏度

ELISA試劑盒的好壞往往就取決于靈明度的高低，因而靈敏度也是咱們挑選ELISA試劑盒的一個重要技術(shù)參數(shù)。靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的才能，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標的量挑選合適的試劑盒，假如待檢目標量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可挑選高敏的ELISA試劑盒。

3、重復(fù)性

科學(xué)實驗講究重復(fù)性，一般 ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。
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二、樣本要求:

1．樣本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

三、樣本處理及要求：

1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)�標本放�?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。